Noble española. I virreina consorte de las Indias. Hija de Fernando Álvarez de Toledo y Enríquez, hijo del I duque de Alba, y de María de Rojas. Casada con Diego Colón, II Almirante de las Indias, hijo de Cristóbal Colón. Fueron padres de 7 hijos (3 varones y 4 hijas): Felipa, Luis, María, Juana, Isabel, Cristóbal y Diego Colón de Toledo. Llegó en 1509 a Santo Domingo acompañando a su marido que había sido nombrado virrey y almirante de las Indias. Desde la muerte de su marido el 23 de febrero de 1526 hasta la mayoría de edad de su hijo Luis Colón de Toledo, la virreina ejercerá de tutora y representante legal de su hijo. Entre los asuntos más relevantes que hubo de gestionar destacan los pleitos colombinos con la defensa de los futuros derechos de su primogénito, Luis Colón, así como el traslado de los restos mortales de Cristóbal Colón y Diego Colón. En relación al primer punto, en 1536 se alcanzó un acuerdo entre la Corona y los Colón con los siguientes puntos: el título de almirante de las Indias se convirtió en hereditario y con derechos similares a los disfrutados por los almirantes de Castilla; la supresión del virreinato y la gobernación general de las Indias, constitución del señorío colombino con el título de marqués de Jamaica y ducado de Veragua, la perpetuidad del oficio de alguacil mayor de Santo Domingo y la concesión de diversas rentas anuales como juro de heredad.

De su matrimonio con Diego Colón tuvo abundante prole, como Felipa, María, Juana, Isabel, Luis, Cristóbal y Diego:

-Felipa, la hija mayor, era enferma y santa persona, quizá fuera religiosa, pero debió de morir pronto. -Isabel casó con Jorge de Portugal.

-Juana contrajo matrimonio con Luis de la Cueva, capitán de las Guardias Reales e hijo del duque de Alburquerque.

-María lo hizo con el almirante de Aragón, Sancho de Cardona. -

Diego en su testamento del 13 de junio de 1544 se declaró casado con Isabel Justiniana, "preñada en cuatro meses más o menos". Tres días después, sin embargo, en otro documento, no consta que estuviera casado.

-En 1540, Luis Colón fue nombrado capitán general de la isla La Española.